背景介绍
抑胃肽又名“肠激肽”，是一组胃肠激素，能引起进食后胰腺胰岛β细胞释放胰岛素的量的增加，并能抑制胰腺胰岛a细胞胰高血糖素的释放。抑胃肽即GIP，典型的肠促胰岛素样GLP-1，从肠粘膜分离和测序，命名为“胃抑制肽”，1970年抑胃肽被更名为“葡萄糖依赖型”促胰岛素肽。据报道，GIP受体是在细胞如胰腺，脂肪细胞或成骨细胞的β细胞中表达。抑胃肽在保留每个细胞体内摄取的营养物质方面起着至关重要的作用，并且GIP信号的控制可导致代谢综合征的改善。GIP抑胃肽在血液中被DPPIV从GIP（1-42）的活性形式快速灭活GIP（3-42）。该ELISA试剂盒检测人的GIP两种类型，活性形式（1-42）和灭活形式（3-42），并可以测量样品中的总GIP。
检测原理
该试剂盒检测标的物是抑胃肽，是使用2种高度特异性抗体的固相夹心ELISA。四甲基联苯胺（TMB）用作着色剂（Chromogen）。染色程度与样本中的总的抑胃肽GIP的数量成比例。
实验步骤
抑胃肽的检测实验实施前，将所有试剂应平衡至室温，大约30min，充分混匀，确保试剂质量无改变，标准曲线和样品检测必须同时进行。
1) 确定试剂空白孔，并加入100ul EIA缓冲液。
2) 确定样本空白孔、样本孔和标准品孔，并将样本空白（管8），样本和标准品（管1-7）100ul分别加入相应的孔中。
3) 盖板，37℃孵育60min。
4) 洗板，倒去孔内反应液，按要求加入预先准备好的洗涤液(每孔不少于350ul)，，再弃去废液。重复洗板4次。在吸水纸上拍干，去除残留液滴。
5) 在此抑胃肽的检测实施过程中，除试剂空白孔外，将其余孔中加入100ul 准备好的标记抗体。
6) 盖板，4℃孵育60min。
7) 洗板，倒去孔内反应液，按要求加入预先准备好的洗涤液(每孔不少于350ul)，，再弃去废液。重复洗板5次。在吸水纸上拍干，去除残留液滴。
8) 取需要量的底物液到一次性检测管中，每孔加入100ul TMB溶液。为了避免污染，检测管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
9) 黑暗中室温孵育30min，颜色变蓝。
10) 此时，抑胃肽的检测实验已完成关键部分，每孔加入100ul 终止液终止反应，通过点击板的一面来混合板内溶液，此时颜色变为黄色。
11) 读取OD值：将板底污物清除，并保证板孔内无气泡，以空白孔为对照进行标准品和样本的测量。测量在450nm处进行，参考波长600-650nm，测量应在终止液加入后30min内进行。
