【前言简介】
军团菌是某些原生动物的需氧革兰氏阴性兼性胞内寄生病原体。它们存在于世界各地的淡水环境中,可引起人类呼吸道疾病(军团病)。军团菌是在费城一家酒店的1976年美国退伍军人大会代表们爆发肺炎后首次发现的。军团菌属目前至少有50个物种,包括70个不同的血清群。军团菌的一种,嗜肺军团菌,是大约90 %的军团病病例的病原体,血清组1(Sg1)约占这些病例的84 %。嗜肺军团菌在25~42°C的温度下繁殖,最适生长温度为35°C。军团菌在环境中的温暖、死水和人工系统中生长,如冷却塔、蒸发冷凝器、冷热水系统和模拟生物生长的自然环境的温泉池。这些系统还提供了产生气溶胶/液滴和生物体分散到大气中的方法。军团病可通过吸入含有军团菌的气溶胶或微吸被军团菌污染的摄入水而获得。人与人之间的传播被认为不是一种风险。感染军团病的可能性取决于水源中的污染程度、暴露者的易感性和暴露的强度。军团病的特征是一种“机会性”疾病,攻击患有潜在疾病或免疫系统薄弱的人。易感风险包括年龄增长、男性、严重吸烟、酗酒、慢性肺部疾病、免疫抑制治疗、癌症化疗、器官或骨髓移植和皮质类固醇治疗。军团菌病可出现在两种不同的临床表现中:肺炎军团菌病(军团病),潜伏期约为2-10天(可延长至16-20天)和庞提亚克热(潜伏期:通常为12-48小时)。军团菌肺炎(军团病)是一种严重的肺炎,其病死率为10-15 %。军团病患者最初表现为咳嗽、发烧和非特异性症状,包括不适、肌痛和头痛。一些患者会出现颤抖的寒战、胸痛、腹泻、精神错乱或其他神经系统症状。肺外受累是罕见的。庞提亚克热是一种较温和的疾病,无肺炎的表现,表现为一种流感样疾病。症状可能包括头痛、寒战、肌肉疼痛、干咳和发烧。它通常是自我限制的,通常不需要治疗。发作率远高于军团病患者(高达95%)。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物(HRP),与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被嗜肺军团菌抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,含抗人IgG/IgM(RF吸附剂),即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgG/IgM抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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