【前言简介】
梭状芽孢杆菌是一种能形成孢子的革兰氏阳性细菌。圆形孢子形成在末端,在显微镜下形成“网球拍”的形状。破伤风只有在破伤风梭菌孢子进入伤口和小裂口后,在严格的厌氧条件下萌发时才会发展。该病的临床表现主要不是由兴奋物的侵袭引起的,而是由一种强大的神经毒素(破伤风痉挛蛋白)的分泌引起的。这种毒素阻断了信号转导的抑制,并与中枢神经系统具有很高的亲和力。其结果是肌肉对外部刺激的过度兴奋性,结合上肌肉张力的主要增加,而没有意识的影响。它开始于肌肉的紧张性痉挛(肌肉),模仿肌肉和大肌。随访颈部、背部和腹部肌肉组织。同时,整个肌肉群出现反射性痉挛会妨碍呼吸。流涎过多和吞咽问题会导致吸入性呼吸和肺炎。破伤风梭菌普遍存在于人和动物的土壤和肠道中。摄入的细菌或在人或动物的肠道中生长是无害的。这些孢子对高温有极强的抵抗力,并且可以很长时间地保持传染性。即使是最小的伤口也能进入皮肤下面。在欧洲,破伤风主要发生在受伤后,有时也发生在术后,而在发展中国家,破伤风广泛传播。世卫组织假设全球每年有100万人死于破伤风。破伤风毒素是一种极好的免疫原,只有一种抗原型毒素。控制破伤风的唯一有效方法是预防性主动免疫。
【检测原理】
特异性抗体的定量免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样本的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样本材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样本中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8
2)样本稀释液 1×100ml,pH 7.2 ± 0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,即用型
6)底物液 1×15ml,即用型
7)标准品 4x2ml,即用型
标准品A 0. 0 IU/mL 蓝盖
标准品B 0.1 IU/mL 绿盖
标准品C 0.5 IU/mL 黄盖
标准品D 1.0 IU/mL 红盖
8)盖箔 1x
9)使用说明书 1x
10)布局表 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10和1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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