【前言简介】
疟疾是最常见的热带寄生虫病,到目前为止,在非流行地区的返回旅客中也很重要。疟原虫(卵形疟原虫、三日疟原虫,间日疟原虫和恶性疟原虫)的传播是通过按蚊雌性蚊子的叮咬发生的。恶性疟原虫和间日疟原虫是最常见的类型。感染的最初症状是非特异性的(头痛、发烧、发冷、头晕、恶心),可能持续数天。几天或几周后,根据物种的不同,每3到4天就会出现周期性发热。对于热带疟疾,这些周期性阶段通常不明显。特别危险的是来自非流行地区的儿童和未免疫成人(来自美国和欧洲的游客)以及来自流行地区的6个月至3岁的儿童。疟疾流行地区的成年人对疟疾产生了某种抵抗力。其他感染途径是经胎盘,通过输血或吸毒者中受污染的注射器
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板包被有特定的抗原以结合样品的相应抗体。在洗板以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产物的颜色强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成成分】
1) 微孔板 96孔,包被重组疟原虫抗原(恶性疟原虫、间日疟原虫)
2) 样品稀释液 1x100 mL,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,即用型
3) 阳性质控 1x2 mL,即用型
4) 临界质控 1x3 mL,即用型
5) 阴性质控 1x2 mL,即用型
6) 底物液 1x15 mL,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7) 终止液 1x15 mL,硫酸,0.2mol/L,即用型
8) 洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1x50 mL,pH 7.2 ± 0.2
9) 酶联物 1x20 mL,过氧化物酶标记的人IgG/IgM抗体,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
所需材料(未提供)
1) 酶标仪
2) 移液器:10µL-1000µL
3) 一次性试管
4) 手动或自动洗板装置
5) 蒸馏水
6) 涡旋混合器
7) 37℃培养箱
【试剂盒保存】
当在2℃到8℃下储存时,未打开的试剂将保持其稳定性直到有效期。在此日期之后请勿使用试剂。
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