【前言简介】
溶组织内阿米巴是一种厌氧菌寄生虫,形成包囊,有四个小核,直径为10-15µm。这些包囊很坚固,并且能抵抗不利的环境条件。在被易感宿主(无脊椎动物和包括人类在内的脊椎动物)摄取后,它的壁被一个小开口破坏,变形虫通过这个开口出现。变形虫连续分裂3个周期,从一个囊肿中产生8个单核滋养体,直径为20-30µm。一些滋养体然后侵入大肠的组织,并可能被广泛地侵蚀它们,从而进入血液。因此,变形虫可以到达身体的各个部位。溶组织内阿米巴感染在世界范围内分布。它是阿米巴病和阿米巴痢疾的病原体,栖息于大肠的管腔和黏膜,主要是横结肠和盲肠。额外的肠道阿米巴病可折磨任何器官或组织。大多数感染者没有症状;无症状携带者的高发病率使问题复杂化。那些有症状的患者会有广泛的表现。所有年龄组的成员和男女都被感染了。感染的风险随着卫生条件不足的增加而增加。在农业职业和男性同性恋者中,接触农业职业的人患阿米巴病的风险增加。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被溶组织内阿米巴抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的蛋白A,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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