【前言简介】
单纯疱疹是一种包膜DNA病毒(直径150-200nm),属于ɑ-疱疹病毒科。根据抗原性、生化性和生物学上的差异,可分为HSV-1和HSV-2两种血清型。人类是唯一已知的自然宿主和病毒来源。HSV-1型通常会导致口腔疱疹,而HSV-2型通常会影响生殖器区域。大多数时候,HSV-1和HSV-2是不活跃的,或“沉默的”,没有引起任何症状,但一些感染者有“水泡和溃疡的爆发”。一旦感染了单纯疱疹病毒,人们仍将终生被感染。单纯疱疹病毒是人类最常见的感染源之一,而且任何一种单纯疱疹病毒似乎都能够感染类似的身体部位。高比例的成人人群血清阳性。(约90%的HSV-1,依赖于10-30%的HSV-2的社会经济地位)。原发性HSV-1感染通常发生在儿童早期(6至18个月大)。HSV-2通常产生轻微的症状,大多数人没有公认的症状。有风险的人是患有遗传性T细胞缺陷的儿童和因感染(如艾滋病毒)、移植而受到免疫抑制的患者。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物(HRP),与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被单纯疱疹病毒1+2抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2±0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2±0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgG抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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