【前言简介】
查加斯病发生在中美洲和南美洲。它是一种通过咬伤传播给人类的传染病,由一种受感染的红蝇科昆虫引起。这种感染是由克氏锥虫(一种单细胞寄生虫)引起的。感染经过不同阶段,并通常导致慢性疾病。南美洲有400万至500万人正在遭受这种疾病,主要受到危害的是生活在贫困条件下的人。高达10%的感染是致命的,婴儿和新生儿有严重的风险。这种感染是由红蝇科的不同种类的昆虫传播给人类的,寄生虫不会带着小虫进入人体。克氏锥虫生活在该虫的粪便中,通过皮肤伤口侵入人体。新生儿在子宫内有感染的危险,通过输血感染也是可能的。1-2%的感染者在潜伏期为1-4周后出现症状,15岁以下的儿童主要受影响。这种疾病经历了三个不同的阶段。急性期出现发热、腹泻、肠绞痛、淋巴结肿大和全身肿胀。特别是在新生儿和婴儿中,心脏或大脑的炎症是可能的。急性期持续约4周,急性查加斯病主要是儿童疾病。在许多情况下,这种疾病是可痊愈的。潜伏期的特征是大多数患者没有症状,偶尔会发生免疫系统的减弱,这一阶段可以持续几年。10%至20%的感染者进入慢性期。不同的内部器官如心脏、肠道或神经系统可能会受到影响。患者通常死于心源性猝死或慢性心功能不全,预后取决于心脏变异的程度。已经使用了多种诊断方法,但检测克氏锥虫抗原抗体仍然是诊断感染的最有力方法。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样本的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样本材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样本中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8
2)样本稀释液 1×100ml,pH 7.2 ± 0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,即用型
6)底物液 1×15ml,即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)盖箔 1x
11)使用说明书 1x
12)布局表 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10和1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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