【前言简介】
螺旋体是一种具有周质轴丝的运动细菌。所有致病种均属于密螺旋体科,包括密螺旋体、伯氏螺旋体和钩端螺旋体三个属。密螺旋体是非常长的,灵活的,丝状的细胞,通常是一个典型的螺旋状,或螺旋弹簧状。疏螺旋体科是最大的密螺旋体科,螺旋体非常粗糙和不规则。伯氏疏螺旋体是莱姆病的病原体,主要通过蜱虫传播,但也可能通过其他吸血昆虫传播。栖息地是北美、欧洲、北非、澳大利亚和日本的树木繁茂、潮湿和温带地区;林员、农民和任何进入受感染森林的人都可能受到影响。蜱虫的污染程度为3-60%,取决于季节和地区的差异;多达30%的人口可能被感染(美国每年约1500例,欧洲有数百例)。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被重组伯氏疏螺旋体抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,含抗人IgG/IgM抗体(RF吸附剂),即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgG/IgM抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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