【前言简介】
布鲁氏菌是一种小的革兰氏阴性菌(直径0.4-0.8µm,长0.4-3.0µm),无鞭毛,无孢子形成。它们是以军医David Bruce的名字命名的,他于1887年在马耳他从一名死于波动热的士兵的脾脏中分离出了病原体。四种致病:流产布鲁氏菌、马耳他热鲁氏菌、猪布鲁氏菌和犬布鲁氏菌。所有这四种疾病都是布鲁氏菌病的激发物,这是一种以波动性发热为特征的疾病。根据刺激者的不同,这种疾病也被称为邦氏病 (流产布鲁氏菌)或马耳他热 (马耳他热布鲁氏菌)。病原体来自动物,主要受影响。这种感染是由接触生病的动物或其排泄物,以及非巴氏灭菌的牛奶和绵羊或山羊的新鲜奶酪引起的。主要入口有皮肤伤口、结膜和消化道。完整的病原体通过粒细胞运输到局部淋巴结,从那里它们传播血源性的。各种器官都可能被感染。症状取决于发生炎症的受感染的器官。到目前为止,其致病机制尚未完全了解。布鲁氏菌病出现在世界各地。在非巴氏灭菌的牛奶和奶制品中,布鲁氏菌是可存活的和传染性长达数周。由流产布鲁氏菌引起的牛布鲁氏菌病仍然是最广泛的形式,尽管各国报告的发病率和流行率差异很大(从<0.01到>200)。布鲁氏菌是经常饲养羊和山羊的地区特有的。它会导致严重的人类感染。在实验室处理这些细菌需要非常小心,因为传染性。风险群体包括屠宰场工人、肉类检查员、动物饲养员、兽医和实验室人员。布鲁氏菌病是一种国家应报告的疾病,可向地方卫生当局报告。
【检测原理】
特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被布鲁氏菌抗原
2)样品稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,含抗人IgG/IgM抗体(RF吸附剂),即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgG/IgM抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)阳性质控 1×2ml,即用型
8)临界质控 1×3ml,即用型
9)阴性质控 1×2ml,即用型
10)封板纸 1x
11)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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