【前言简介】
棒状杆菌是一种不规则形状的需氧非芽孢形成的革兰氏阳性杆状体(0.5-1µm厚,长2-6µm)。它们包括皮肤共生体、机会病原体和几种主要病原体,包括白喉棒状杆菌。一般来说,它们是从含有亚碲酸盐的选择性培养基上的咽拭子中分离出来的。由白喉梭菌引起的细菌感染有两种形式。呼吸性白喉通常是由产毒素(产毒)毒株引起的;皮肤疾病可由产毒或非产毒菌株引起。在呼吸道形式的疾病中,形成一种膜;这种膜通常在喉部或扁桃体上可见。当细胞膜阻塞呼吸时,人可能会死于窒息。其他并发症是由白喉毒素(心肌炎,神经麻痹)的远程作用引起的。皮肤白喉通常是轻微的,通常由非明显的溃疡或浅层溃疡组成,很少涉及毒性并发症(1-2%的产毒菌株感染)。白喉是疫苗接种前时期儿童死亡的最常见原因之一。自从大多数工业化国家引进白喉类毒素疫苗(福尔马林灭活白喉毒素)并广泛使用以来,这种疾病现在的特点是散发病例和低强度的间歇性暴发。但是,最近在一些东欧国家的白喉流行再次引起人们对这种被遗忘的“疾病”的注意,而且,这些病例大多数发生在青少年和成人中,而不是儿童。控制白喉的唯一有效方法是通过预防性的白喉类毒素免疫。类毒素抗体可防止毒素的作用;经免疫接种的人可被产生毒素的白喉菌株感染,但不会出现白喉的系统性表现。通过早期、适当的治疗,可以改善疾病的结果。及时识别该疾病对于确保早期、适当的白喉抗毒素治疗很重要。
【检测原理】
特异性抗体的定量免疫酶学测定是基于ELISA(酶联免疫吸附试验)技术。微孔板上包被特定的抗原,以结合样本的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样本材料后,添加酶联物,与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中,未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物,得到蓝色反应产物,可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样本中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应,蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。
【试剂盒组成】
1)微孔板 12x8,包被白喉棒状杆菌毒素(类毒素)抗原
2)样本稀释液 1×100ml,磷酸盐缓冲液(10mM),pH 7.2 ± 0.2,即用型
3)终止液 1×15ml,硫酸,0.2mol/L,即用型
4)洗涤浓缩液 20倍浓缩,磷酸盐缓冲液(0.2M),1×50ml,pH 7.2 ± 0.2
5)酶联物 1×20ml,过氧化物酶标记的人IgG抗体,即用型
6)底物液 1×15ml,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),即用型
7)质控品 1×2ml,即用型
8)标准品 5x2ml,即用型(标准品按照“第一个白喉抗毒素人IgG国际标准”进行校准)
标准品A 0.000 IU/mL 蓝盖
标准品B 0.015 IU/mL 绿盖
标准品C 0.075 IU/mL 黄盖
标准品D 0.150 IU/mL 红盖
标准品E 1.000 IU/mL 白盖
9)封板纸 1x
10)使用说明书 1x
【所需的材料和设备】(未提供)
1)酶标仪
2)37℃培养箱
3)手动或自动洗板装置
4)移液器:10-1000µL
5)涡旋混合器
6)蒸馏水
7)一次性试管
【储存条件】
试剂盒必须储存于2-8℃的环境中,打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。
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